01 什么是細胞傳代?
隨著細胞不斷生長,培養(yǎng)瓶中的細胞數(shù)量會逐漸增加。當細胞達到一定密度后:
營養(yǎng)會逐漸不足
代謝廢物開始累積
細胞之間空間不足
此時,如果繼續(xù)培養(yǎng),就容易導致:
生長速度下降
細胞狀態(tài)變差
甚至出現(xiàn)死亡或分化異常
因此,需要將部分細胞轉移到新的培養(yǎng)環(huán)境中繼續(xù)培養(yǎng),
這一過程就稱為——
細胞傳代
簡單來說:?? 就是給細胞“換一個更寬敞的新環(huán)境”。
02貼壁細胞為什么需要“消化”
對于貼壁細胞來說,細胞會牢固附著在培養(yǎng)表面。
因此在傳代前,需要先讓細胞從培養(yǎng)表面脫離。
實驗中通常會使用:胰酶(Trypsin)或其他細胞消化液對細胞進行短時間處理。
這一過程稱為:
細胞消化
很多新手最容易出現(xiàn)的問題就是:
?? “消化過度”。
如果消化時間過長,可能導致:
細胞膜受損
貼壁能力下降
細胞活率降低
因此,在顯微鏡下觀察到:
細胞邊緣變圓
細胞開始脫落
通常就需要及時終止消化。
03 細胞傳代的基礎流程
一個標準的貼壁細胞傳代流程通常包括:
1? 觀察細胞狀態(tài)
確認:
細胞密度是否合適
是否存在污染
細胞形態(tài)是否正常
通常建議在:
?? 70%–90%融合度 時進行傳代。
2? 吸除舊培養(yǎng)基
去除培養(yǎng)過程中產生的代謝廢物。
3? PBS清洗
用于去除殘留血清,避免影響后續(xù)消化效果。
4? 加入消化液
使貼壁細胞逐漸脫離培養(yǎng)表面。
5? 終止消化并重懸細胞
加入含血清培養(yǎng)基終止消化,輕柔吹打重懸。
6?低速離心去除上清
用新鮮培養(yǎng)基重懸
7?按比例接種至新培養(yǎng)器皿根據(jù)實驗需求進行分瓶或擴增培養(yǎng)。
特別提醒:實驗中新手傳代最容易踩的坑
? 吹打過猛
容易造成機械損傷。
? 消化不足或過度
都會影響后續(xù)貼壁與增殖。
? 細胞密度控制不合理
過稀或過密都可能導致狀態(tài)波動。
? 忽視培養(yǎng)表面穩(wěn)定性
對于貼壁細胞來說,培養(yǎng)表面直接影響:
細胞附著
鋪展
生長狀態(tài)
因此,穩(wěn)定的培養(yǎng)耗材非常重要。
04 耐思在細胞傳代中的產品支持
圍繞細胞培養(yǎng)的常見應用場景,耐思提供多種穩(wěn)定、可控的一次性耗材解決方案:
細胞培養(yǎng)瓶 / 培養(yǎng)板
高透明度,便于觀察細胞形態(tài)與貼壁狀態(tài)
穩(wěn)定的表面性能,支持貼壁細胞培養(yǎng)需求
針對貼壁細胞培養(yǎng)需求,耐思細胞培養(yǎng)類耗材提供 TC 處理與未 TC 處理 兩種規(guī)格,可根據(jù)具體實驗場景靈活選購。TC(Tissue Culture)表面處理通過對高品質聚苯乙烯(PS)基材表面進行受控改性,從而增強細胞附著能力,促進貼壁細胞快速鋪展與穩(wěn)定生長。
離心管 / 凍存管
良好密封性,降低細胞轉移與儲存過程中的風險
適用于細胞收集、凍存及復蘇等基礎操作
血清移液管 / 吸頭
內壁光滑,液體殘留少
超強疏水性、超低吸附性
幫助降低人為操作帶來的不確定因素
產品細胞培養(yǎng)類耗材均保證:
無細胞毒性、
無 DNA、無 DNase/RNase