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2026-05-18197 次瀏覽
耐思課堂 | 細胞傳代怎么做?新手必看的基礎操作指南

01 什么是細胞傳代?

隨著細胞不斷生長,培養(yǎng)瓶中的細胞數(shù)量會逐漸增加。當細胞達到一定密度后:

營養(yǎng)會逐漸不足

代謝廢物開始累積

細胞之間空間不足

此時,如果繼續(xù)培養(yǎng),就容易導致:

生長速度下降

細胞狀態(tài)變差

甚至出現(xiàn)死亡或分化異常

因此,需要將部分細胞轉移到新的培養(yǎng)環(huán)境中繼續(xù)培養(yǎng),

這一過程就稱為——

細胞傳代

簡單來說:?? 就是給細胞“換一個更寬敞的新環(huán)境”。


02貼壁細胞為什么需要“消化”

對于貼壁細胞來說,細胞會牢固附著在培養(yǎng)表面。

因此在傳代前,需要先讓細胞從培養(yǎng)表面脫離。

實驗中通常會使用:胰酶(Trypsin)或其他細胞消化液對細胞進行短時間處理。

這一過程稱為:

細胞消化

很多新手最容易出現(xiàn)的問題就是:

?? “消化過度”。

如果消化時間過長,可能導致:

細胞膜受損

貼壁能力下降

細胞活率降低

因此,在顯微鏡下觀察到:

細胞邊緣變圓

細胞開始脫落

通常就需要及時終止消化。


03 細胞傳代的基礎流程

一個標準的貼壁細胞傳代流程通常包括:

1? 觀察細胞狀態(tài)

確認:

細胞密度是否合適

是否存在污染

細胞形態(tài)是否正常

通常建議在:

?? 70%–90%融合度 時進行傳代。

2? 吸除舊培養(yǎng)基

去除培養(yǎng)過程中產生的代謝廢物。

3? PBS清洗

用于去除殘留血清,避免影響后續(xù)消化效果。

4? 加入消化液

使貼壁細胞逐漸脫離培養(yǎng)表面。

5? 終止消化并重懸細胞

加入含血清培養(yǎng)基終止消化,輕柔吹打重懸。

6?低速離心去除上清

用新鮮培養(yǎng)基重懸

7?按比例接種至新培養(yǎng)器皿根據(jù)實驗需求進行分瓶或擴增培養(yǎng)。



特別提醒:實驗中新手傳代最容易踩的坑

? 吹打過猛

容易造成機械損傷。

? 消化不足或過度

都會影響后續(xù)貼壁與增殖。

? 細胞密度控制不合理

過稀或過密都可能導致狀態(tài)波動。

? 忽視培養(yǎng)表面穩(wěn)定性

對于貼壁細胞來說,培養(yǎng)表面直接影響:

細胞附著

鋪展

生長狀態(tài)

因此,穩(wěn)定的培養(yǎng)耗材非常重要。


04 耐思在細胞傳代中的產品支持


圍繞細胞培養(yǎng)的常見應用場景,耐思提供多種穩(wěn)定、可控的一次性耗材解決方案:

細胞培養(yǎng)瓶 / 培養(yǎng)板

高透明度,便于觀察細胞形態(tài)與貼壁狀態(tài)

穩(wěn)定的表面性能,支持貼壁細胞培養(yǎng)需求

針對貼壁細胞培養(yǎng)需求,耐思細胞培養(yǎng)類耗材提供 TC 處理與未 TC 處理 兩種規(guī)格,可根據(jù)具體實驗場景靈活選購。TC(Tissue Culture)表面處理通過對高品質聚苯乙烯(PS)基材表面進行受控改性,從而增強細胞附著能力,促進貼壁細胞快速鋪展與穩(wěn)定生長。

離心管 / 凍存管

良好密封性,降低細胞轉移與儲存過程中的風險

適用于細胞收集、凍存及復蘇等基礎操作

血清移液管 / 吸頭

內壁光滑,液體殘留少

超強疏水性、超低吸附性

幫助降低人為操作帶來的不確定因素


產品細胞培養(yǎng)類耗材均保證:

  • 無菌
  • 無熱源/內毒素

無細胞毒性、

無 DNA、無 DNase/RNase

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